Kansere karşı ileri karakol: yalnızca evrensel kanser belirteçleri

MİNİ İNCELEME

Kansere karşı ileri karakol: yalnızca evrensel kanser belirteçleri

Chengchen Qian1, Xiaolong Zou2, Wei Li1,3, Yinshan Li4, Wenqiang Yu5

1Shanghai Epiprobe Bioteknoloji Co., Ltd, Şangay 200233, Çin;2 Harbin Tıp Üniversitesi'nin İlk Bağlı Hastanesi, Genel Cerrahi Bölümü, Harbin 150001, Çin;3Shandong Epiprobe Medical Laboratory Co., Ltd, Heze 274108, Çin;4 Ningxia Hui Özerk Bölgesi Halk Hastanesi, Ningxia Tıp Üniversitesi, Yinchuan 750002, Çin;5Şangay Halk Sağlığı Klinik Merkezi ve Genel Cerrahi Bölümü, Huashan Hastanesi ve Kanser Metastaz Enstitüsü ve RNA Epigenetik Laboratuvarı, Biyomedikal Bilimler Enstitüleri, Şanghay Tıp Fakültesi, Fudan Üniversitesi, Şangay 200032, Çin

SOYUT

Kanser dünya çapında önde gelen ölüm nedenidir.Kanserin erken teşhisi tüm kanser türlerinin ölüm oranını azaltabilir;ancak çoğu kanser türü için etkili erken teşhis biyobelirteçleri eksiktir.DNA metilasyonu her zaman önemli bir ilgi odağı olmuştur çünkü DNA metilasyonu genellikle diğer tespit edilebilir genetik değişikliklerden önce meydana gelir.DNA metilasyonu için yeni bir kılavuz konumlandırma dizilimi kullanılarak kanserin ortak özellikleri araştırılırken, bir dizi evrensel yalnızca kanser belirteci (UCOM'lar), kanserin etkili ve doğru erken teşhisi için güçlü adaylar olarak ortaya çıktı.Mevcut kanser biyobelirteçlerinin klinik değeri düşük duyarlılık ve/veya düşük özgüllük nedeniyle azalırken, UCOM'ların benzersiz özellikleri klinik açıdan anlamlı sonuçlar sağlar.UCOM'ların akciğer, rahim ağzı, endometriyal ve ürotelyal kanserlerdeki klinik potansiyelinin doğrulanması, UCOM'ların birden fazla kanser türünde ve çeşitli klinik senaryolarda uygulanmasını daha da destekler.Aslında UCOM'ların uygulamaları şu anda kanserin erken tespiti, yardımcı tanı, tedavi etkinliği ve nüks izleme konularında daha ileri değerlendirmelerle aktif olarak araştırılmaktadır.UCOM'ların kanserleri tespit etmesini sağlayan moleküler mekanizmalar araştırılacak bir sonraki önemli konudur.UCOM'ların gerçek dünya senaryolarına uygulanması aynı zamanda uygulama ve iyileştirme gerektirir.

ANAHTAR KELİMELER

Kanser tespiti;kanser taraması;DNA metilasyonu;kanser epigenetiği;kanser biyobelirteçleri

Neden acilen yeniliğe ihtiyacımız var? biyobelirteçler?

Bir asırdan fazla bir süredir kanserle mücadele eden kanser, hâlâ insanlık için en ölümcül biyolojik tehdit olmaya devam ediyor.Kanser, 2020'de tahmin edilen 19,3 milyon yeni vaka ve yaklaşık 10 milyon ölümle küresel bir sağlık sorunu olmaya devam ediyor1. 2020'de Çin'de tahminen 4,6 milyon yeni kanser vakası teşhis edildi ve bu, GLOBOCAN1'e göre küresel yeni kanser vakalarının %23,7'sini oluşturuyor.Ayrıca, 2020 yılında Çin'de yaklaşık 3 milyon ölüm kansere atfedilmiştir; bu, küresel kansere bağlı ölümlerin %30'unu oluşturmaktadır1.Bu istatistikler, Çin'in kanser görülme sıklığı ve ölüm oranında ilk sırada yer aldığını gösterdi.Üstelik kanserde 5 yıllık hayatta kalma oranı %40,5 olup, bu oran Amerika Birleşik Devletleri'ndeki 5 yıllık hayatta kalma oranından 1,5 kat daha düşüktür2,3.Çin'de insani gelişme indeksi daha yüksek olan ülkelere kıyasla nispeten daha düşük hayatta kalma ve daha yüksek ölüm oranları, etkili ve uygun maliyetli bir kanser önleme ve gözetim sistemine acilen ihtiyaç duyulduğunu göstermektedir.Kanserin erken teşhisi sağlık sisteminin en kritik unsurlarından biridir.Kanserin erken teşhisi, hemen hemen tüm kanser türlerinde prognozu ve erken aşamada sağkalımı iyileştirebilir4.Başarılı tarama stratejileri rahim ağzı, meme, kolorektal ve prostat kanserlerinin görülme sıklığı ve ölüm oranlarında önemli bir düşüşe yol açmıştır.

Ancak kanserin erken teşhisini sağlamak kolay bir iş değil.Erken kanserin biyolojisi ve prognozunun araştırılması, güvenilir erken teşhis biyobelirteçlerinin belirlenmesi ve doğrulanması, erişilebilir ve doğru erken teşhis teknolojilerinin geliştirilmesi her zaman bu süreçteki en büyük engeller olmuştur4.Kanserin kesin tespiti, iyi huylu lezyonları kötü huylu lezyonlardan ayırt edebilir, bu da gereksiz prosedürlerden kaçınmaya yardımcı olur ve hastalığın daha ileri düzeyde yönetilmesini kolaylaştırır.Mevcut erken teşhis stratejileri arasında endoskop bazlı biyopsiler, tıbbi görüntüleme, sitoloji, immünolojik testler ve biyobelirteç testleri yer almaktadır5-7.Müdahaleci ve maliyetli olan endoskop bazlı biyopsiler, profesyonel personele dayanan önemli bir tıbbi prosedür olarak doğası gereği ağır bir yük taşır.Sitoloji gibi her iki tarama yöntemi de tıp uzmanlarına bağlıdır ve ideal olmaktan uzak bir performansla kişisel karara dayanır8.Buna karşılık, yüksek yanlış pozitiflik oranları göz önüne alındığında immünoanalizler son derece hatalıdır.Bir tarama taktiği olarak tıbbi görüntüleme, pahalı ekipman ve uzman teknisyenler gerektirir.Dolayısıyla tıbbi görüntüleme, erişilebilirliğin düşük olması nedeniyle son derece sınırlıdır.Tüm bu nedenlerden dolayı biyobelirteçler kanserin erken teşhisinde daha iyi bir seçenek gibi görünmektedir.

Yazışma yeri: Yinshan Li ve Wenqiang Yu

Email: liyinshan@nxrmyy.com and wenqiangyu@fudan.edu.cn

ORCID Kimliği: https://orcid.org/0009-0005-3340-6802 ve

https://orcid.org/0000-0001-9920-1133

22 Ağustos 2023'te alındı;12 Ekim 2023'te kabul edildi;

28 Kasım 2023'te çevrimiçi yayınlandı.

www.cancerbiomed.org adresinde mevcuttur

©2023 Kanser Biyolojisi ve Tıbbı.Genel yaratıcı

Atıf-Ticari Olmayan 4.0 Uluslararası Lisansı

Biyobelirteçler şu anda proteinler, DNA mutasyon belirteçleri, epigenetik belirteçler, kromozomal anormallikler, doğrudan tümörlerden türetilen RNA belirteçleri veya dolaylı olarak vücut sıvılarından elde edilen tümör fragmanları olarak sınıflandırılmaktadır.Protein belirteçleri kanser tarama ve tanısında en yaygın kullanılan biyobelirteçlerdir.Tarama biyobelirteçleri olarak protein biyobelirteçleri, iyi huylu lezyonlardan etkilenme eğilimi nedeniyle sınırlıdır, bu da a-fetoprotein ve prostat spesifik antijen (PSA)9,10 için bildirildiği gibi aşırı tanıya ve aşırı tedaviye yol açar.RNA işaretleyicileri, genetik ekspresyon modellerini ve diğer kodlamayan RNA işaretleyicilerini içerir. Genetik ifade RNA işaretleyicilerinin bir kombinasyonu, idrar numuneleri kullanılarak tespit edilebilir; bunların duyarlılığı birincil tümörler için tatmin edici olmaktan uzaktır (%60) ve tespiti, normal ortamda RNA'nın kolay bozunma doğasından etkilenebilir11.Genetik ve epigenetik belirteçlerin her ikisi de tümörlerde yaygınlık ve kanser türleriyle sınırlı olma sorunuyla karşı karşıyadır.

DNA metilasyonu, 1983'te Feinberg tarafından kanserle ilk kez ilişkilendirildiğinden beri, erken teşhis biyobelirteçleri olarak güçlü bir aday olmuştur12. DNA metilasyon anormallikleri, kanser öncesi aşama kadar erken bir zamanda, kanserin tüm aşamalarında gözlemlenir.Anormal DNA hipermetilasyonu genellikle tümör baskılayıcılara karşı koymak için gen promoterlerindeki CpG adalarında meydana gelir13,14.Çalışmalar aynı zamanda anormal DNA hipermetilasyonunun gelişimsel düzenleyicilerin yukarı regülasyonunda rol oynadığını da öne sürmektedir15.Yaygın olarak gelişimsel düzenleyiciler ve hipermetile kanserlerle ilişkilendirilen DNA metilasyon vadisi, gen ekspresyon modunu daha stabil bir DNA metilasyonuna bağımlı moda değiştirebilir ve metillenmiş histon H3K27me3 ve ilişkili polietilen proteinlerle bağlantıyı azaltabilir16,17.

Çok sayıda yayınlanmış DNA metilasyon belirteci arasında birçoğu piyasaya başarıyla girmiştir;ancak mevcut ticarileştirilmiş DNA metilasyon belirteçleri ve teşhis panelleri, birçok nedenden ötürü kanserin erken tespit edilmesi potansiyelini henüz tam olarak açığa çıkaramamıştır18.Çoğunlukla veri tabanı bilgilerini kullanarak kabul edilebilir performans gösterirken, bu biyobelirteçler, gerçek dünyadaki örneklerin genellikle daha karmaşık olması ve veritabanlarında seçilenler kadar temsili olmaması nedeniyle gerçek dünyada genellikle daha az ideal performans gösterir.Yeni nesil dizilemeye dayalı çoklu kanser metilasyonu erken tespitinin, evre I ve II kanserlerde sırasıyla yalnızca %16,8 ve %40,4 duyarlılığa sahip olduğu gösterilmiştir19.Erken tespit testleri daha fazla stabilite ve daha doğru biyobelirteçler gerektirir.

Kılavuz konumlandırma sıralamasını (GPS) kullanarak yalnızca evrensel kanser işaretçisi (UCOM) keşfi

On yıllardır süren kanser araştırmalarına rağmen tatmin edici önleme ve tedavi gerçekleştirilememiştir.Araştırmacıların kanseri kapsamlı bir şekilde değerlendirebilmelerini sağlamak için yeni metodolojilere ihtiyaç vardır.Son 23 yılda, apoptozdan kaçınma, doku istilası ve metastaz gibi 6 kanser özelliği, mutasyonel olmayan epigenetik yeniden programlama ve polimorfik mikrobiyomlar20,21 gibi özelliklerin eklenmesiyle 14'e genişletildi.Kanserle ilgili daha fazla ayrıntı ortaya çıktıkça, kanser araştırmalarına daha fazla bakış açısı kazandırılıyor.Kanser araştırmaları yavaş yavaş iki yönde (ortaklık ve bireysellik) yeni bir çağa girmiştir.Son yıllarda hassas onkolojinin gelişmesiyle birlikte, kanser araştırmalarının odak noktası bireyselleştirilmiş hedefe yönelik tedaviye ve kanserin heterojenliğine doğru yönelmektedir22.Bu nedenle, yakın zamanda tanımlanan kanser biyobelirteçleri temel olarak PAX6 forservikal kanser23 ve kolorektal kanser için BMP324 gibi spesifik kanser türlerine odaklanmıştır.Bu biyobelirteçlerin kanser türlerine özel performansları farklılık gösterse de biyolojik örnek alımının kısıtlı olması ve maliyetin yüksek olması nedeniyle duyarlı bireylerin tüm kanserler için aynı anda taranması hala mümkün değildir.Erken aşamada tüm kanser türleri için etkili olan tek ve sağlam bir biyobelirteç belirleyebilseydik ideal olurdu.

Böyle ideal bir hedefe ulaşmak için, potansiyel biyobelirteç türleri listesinden daha iyi bir biyobelirteç adayı seçilmelidir.Tüm genetik ve epigenetik profiller arasında DNA metilasyon anormalliklerinin kanserle ilişkili olduğu bilinmektedir ve kronolojik olarak kanserle ilişkili ilk olmasa da en erken ortaya çıkan anormalliklerden bazılarıdır.DNA metilasyonunun araştırılması erken başladı, ancak araştırma yöntemlerinin eksikliği nedeniyle engellendi.Tümör oluşumunu daha iyi anlamak için genomdaki 28 milyon potansiyel metillenmiş CpG bölgesi arasında yönetilebilir bir sayının tespit edilmesi ve genomla hizalanması gerekir.DNA metilasyon dizilemesinin altın standardı olarak kabul edilen tüm genom bisülfit dizilemesi (WGBS), bisülfit tedavisinin DNA parçalarını kıran ve genom karmaşıklığını azaltan doğası nedeniyle kanser hücrelerindeki C'lerin yalnızca %50'sini kapsayabilmektedir. Cs'nin Ts25'e dönüşümü.450 bin çip gibi diğer yöntemler genom metilasyonunun yalnızca %1,6'sını kapsıyor.450 bin veriye dayanarak, bir DNA metilasyon tespit paneli 6 tip I. evre kanser için %35,4 duyarlılığa sahiptir26.Kanser türlerinin kısıtlılığı, düşük performans ve analitik süreçte tespit yöntemlerinin yarattığı gürültü, pan-kanser tespit panellerinin önündeki en büyük engel haline geldi.

Tümör oluşumu ve metastaz sırasında hücrelerin epigenetik modellerini daha iyi araştırmak amacıyla, genom çapında DNA metilasyon tespiti için 0,4 milyar okumada CpG bölgelerinin %96'sına kadarını kapsayan benzersiz bir GPS geliştirdik25.GPS, bisülfit işleminden sonra dönüştürülemeyen metil-sitozinlerin 3' ucunu kullanan, çift uç dizilimi yoluyla 5' ucunun DNA metilasyon hesaplamasının hizalanmasını yönlendiren iki taraflı bir dizileme yöntemidir (Şekil 1)25.Bir şablon iplikçik görevi gören metil-sitozin kılavuz iplikçik, geleneksel WGBS'de en çok terk edilmiş sıralama verilerini kurtaran yüksek GC bölgesi hizalamasına yardımcı olur.GPS'in yüksek kapsama özelliği, daha önce yeterince incelenmemiş bölgelerde kanser metilasyon profillerini çok daha yüksek bir çözünürlükle incelememize olanak tanıyan muazzam miktarda DNA metilasyon bilgisi sağlar.

GPS bize kanserin homojenliğini araştırmak için güçlü bir araç sağlar; bu, kanser araştırmalarını büyük ölçüde basitleştirebilir ve potansiyel olarak tümör oluşumu ve metastaz için evrensel bir açıklama bulabilir.Kanser hücre hatlarının GPS verileri analiz edilirken benzersiz bir olguyla sıklıkla karşılaşıldı.Çeşitli kanser numunelerinde anormal derecede hipermetile olduğu görülen bazı bölgeler vardı.Bu beklenmedik bulgu daha sonra UCOM olarak hizmet verecek şekilde doğrulandı.Kanser Genomu Atlası (TCGA) veritabanındaki 17 kanser türünden 7.000'den fazla örnek analiz edilmiştir; bunların arasında, tüm kanser türlerinde hipermetile olan histonla ilişkili bir gen olan ilk UCOM olan HIST1H4F'yi belirledik27.Daha sonra TCGA veritabanında, Gene Expression Omnibus (GEO) veritabanında ve gerçek dünyadaki klinik örneklerde bir dizi UCOM bulundu ve doğrulandı.Şu an itibariyle HIST1H4F, PCDHGB7 ve SIX6 UCOM olarak bulunmuş ve doğrulanmıştır.UCOM'ların beklenmedik keşfi, kanserin erken teşhisi ihtiyacına güçlü bir yanıt sunuyor.UCOM'lar birden fazla kanserin tek işaretleyici tespiti için bir çözüm sağlar.

UCOM'ların özellikleri

Doğrulamanın ardından UCOM'ların, UCOM'ların mevcut biyobelirteçlerin etkinliğini aşmasını sağlayan dört ana özellik sergiledikleri gösterilmiştir (Şekil 2).

Maligniteye özgü

UCOM'lar kanserli veya kanser öncesi lezyonlara özgüdür ve normal fizyolojik değişikliklerden etkilenmezler.Erken teşhis ve/veya taramada yaygın olarak uygulanan kanserle ilgili mevcut belirteçlerden bazıları aşırı teşhise yol açmıştır.Klinik olarak onaylanmış bir tarama aracı olan yüksek PSA düzeyleri, prostat hiperplazisi ve prostatit gibi iyi huylu durumlarda da tespit edilir10.Aşırı teşhis ve bunun sonucunda ortaya çıkan aşırı tedavi, bağırsak, idrar ve cinsel komplikasyonlar nedeniyle yaşam kalitesinin düşmesine yol açmaktadır28.CA-125 gibi diğer protein bazlı ve klinik ortamda yaygın olarak kullanılan biyobelirteçler, aşırı tanı ve aşırı tedaviye yol açarken önemli bir fayda sağlamamıştır29.UCOM'ların malignitelere yönelik yüksek özgüllüğü bu eksiklikleri ortadan kaldırır.UCOM, PCDHGB7, yüksek dereceli skuamöz intraepitelyal lezyonları (HSIL'ler) ve rahim ağzı kanserini normal örneklerden ve düşük dereceli skuamöz intraepitelyal lezyonlardan (LSIL'ler) etkili bir şekilde ayırırken, diğer biyobelirteçlerin çoğu rahim ağzı kanserini yalnızca normal örneklerden ayırt edebilir30.PCDHGB7 normal endometriyum ile endometriyal hiperplazi arasında önemli farklar tespit etmese de, normal endometriyum ile atipik hiperplazi arasında önemli farklar tespit edilir ve PCDHGB731'e dayalı olarak normal endometriyum ile endometrial kanser (EC) arasında daha da büyük farklılıklar tespit edilir.UCOM'lar veritabanlarındaki ve klinik örneklerdeki malign lezyonlara özgüdür.Hastanın bakış açısına göre, benzersiz UCOM'lar, çeşitli kötü performans gösteren kararsız biyobelirteçlerin karmaşık göstergelerini ve değerlendirme süreci sırasında buna karşılık gelen kaygıyı anlama eşiğini azaltır.Klinisyenin bakış açısına göre, benzersiz UCOM'lar maligniteleri benign lezyonlardan ayırarak hastaların önceliklendirilmesine yardımcı olur ve gereksiz tıbbi prosedürleri ve aşırı tedaviyi azaltır.Bu nedenle, benzersiz UCOM'lar tıbbi sistem yedekliliğini azaltır, sistem sıkıntısını hafifletir ve ihtiyacı olanlara daha fazla tıbbi kaynak sağlar.

Şekil 1 DNA metilasyon tespiti için GPS iş akışının şeması25.Gri çizgi: giriş DNA dizisi;kırmızı çizgi: Girişin 3' ucunda sitozinin 5'-metilsitozin ile değiştirildiği T4 DNA polimeraz ile işlenmiş DNA;Me'li mavi C: metillenmiş sitozin;mavi C: metillenmemiş sitozin;sarı T: timin25.

Ya hep ya hiç

UCOM'lar yalnızca kanser hücrelerinde bulunur ve neredeyse tüm kanser hücrelerinde stabil olarak tespit edilir.HIST1H4F'nin hemen hemen tüm tümör tiplerinde hipermetile olduğu doğrulandı, ancak normal örneklerde bu durum geçerli değildi27.Benzer şekilde PCDHGB7 ve SIX6'nın da tüm tümör örneklerinde hipermetile olduğu ancak normal örneklerde olmadığı gösterilmiştir30-32.Bu benzersiz özellik, UCOM'ların performansını tespit ve hassasiyet sınırı açısından önemli ölçüde artırır.Örneklerde kanser hücrelerinin %2 kadar azı farklılaşabilmektedir, bu da UCOM'ları mevcut biyobelirteçlerin çoğundan çok daha hassas bir biyobelirteç haline getirmektedir.30 Kolorektal kanser tespiti için kullanılan bir biyobelirteç olarak KRAS mutasyonları, kolorektal kanser vakalarının yalnızca yaklaşık %36'sında mevcuttur. zayıf teşhis potansiyeline işaret etmektedir33.Kolorektal kanserde KRAS mutasyonlarının düşük prevalansı, KRAS'ın diğer biyobelirteçlerle kombinasyonunu sınırlar.Aslında, biyobelirteçlerin bir kombinasyonu başlangıçta umut verici görünebilir, ancak tespit analizinde çok daha fazla gürültü ortaya koyarken her zaman tatmin edici bir sonuç üretmez ve genellikle daha karmaşık deneysel prosedürler içerir.Buna karşılık PCDHGB7 ve diğer UCOM'lar tüm kanserlerde mevcuttur.UCOM'lar, karmaşık gürültü önleyici analiz süreçlerini ortadan kaldırırken, farklı kanser numunelerindeki kanserli bileşenleri en yüksek hassasiyetle tespit eder.Bol bir örnekte kanseri tespit etmek zor değil ama küçük bir örnekte kanseri tespit etmek son derece zordur.UCOM'lar küçük miktarlarda kanseri tespit etme yeteneğine sahiptir.

Şekil 2 UCOM'ların özellikleri.

Patolojik değişikliklerden önce kanser tespiti

UCOM'lar patolojik değişikliklerden önce kanser öncesi aşamada tespit edilebilir.Epigenetik biyobelirteçler olarak UCOM anormallikleri, fenotipik anormalliklerden daha erken bir aşamada ortaya çıkar ve tümör oluşumu, ilerleme ve metastaz34,35 boyunca tespit edilebilir.UCOM'un zaman içindeki duyarlılığı, erken evre kanseri ve kanser öncesi lezyonları tespit etmede UCOM performansını artırır.Biyopsi ve sitolojiye dayanarak kanserin erken teşhisi en deneyimli patologlar için bile zor olabilir.Kolposkopiyle alınan tek biyopside HSIL+ örneklerinin %60,6'sında pozitiflik rapor edilmiştir.Çoklu lezyonlarda duyarlılığı artırmak için ek biyopsiler gereklidir36.Buna karşılık, UCOM PCDHGB7, HSIL+ numuneleri için %82'lik bir duyarlılığa sahip olup, biyopsilerin ve çoğu biyobelirtecin30 duyarlılığını aşmaktadır.Metilasyon işaretçisi FAM19A4'ün CIN2+ için %69 duyarlılığı vardır; bu sitolojiye benzerdir ancak CIN1'i normal örneklerden ayırt edemez37.UCOM'ların çok daha hassas bir erken teşhis biyobelirteçleri olduğu gösterilmiştir.Deneyime dayalı patologlarla karşılaştırıldığında, UCOM'lar erken evre kanserler için üstün tespit duyarlılığına sahiptir ve bu da kanser prognozunun ve hayatta kalmanın iyileşmesine katkıda bulunur30.Ek olarak UCOM'lar, deneyimli patologların bulunmadığı alanlarda erişilebilen ve tespit verimliliğini büyük ölçüde artıran bir tespit platformu sunar.Tek tip numune alma ve tespit prosedürleriyle UCOM tespiti, daha az profesyonel personel ve tıbbi kaynak gerektiren bir tarama protokolüne daha iyi uyan, istikrarlı ve yorumlanması kolay sonuçlar sağlar.

Tespit edilmesi kolay

DNA metilasyonunun tespitine yönelik mevcut yöntemler karmaşık ve zaman alıcıdır.Yöntemlerin çoğu, numune kalitesinde kayba neden olan ve muhtemelen dengesiz ve hatalı sonuçlar üreten bisülfit dönüşümü gerektirir.Bisülfit tedavisinin neden olduğu zayıf tekrarlanabilirlik potansiyel olarak doktorlar ve hastalar için kafa karışıklığına yol açmakta ve takip ve/veya tedavi stratejilerine daha fazla müdahale etmektedir.Bu nedenle, numunelerin sorunlu bisülfit muamelesinden kaçınmak, klinik uygulama gerekliliklerini karşılamak ve erişilebilirliği artırmak için UCOM tespit yöntemini daha da değiştirdik.Kolay kullanım prosedürlerini kullanarak 3 saat içinde UCOM'ların metilasyon durumunu ölçmek için gerçek zamanlı floresan kantitatif PCR (Me-qPCR) ile birleştirilmiş metilasyona duyarlı kısıtlama enzimlerini kullanan yeni bir yöntem geliştirdik (Şekil 3).Me-qPCR, vücut sıvılarının klinik olarak toplanması ve kişinin kendisi tarafından toplanan idrar numuneleri gibi birden fazla numune tipini barındırabilir.Toplanan klinik numuneler standart ve otomatik DNA ekstraksiyonu kullanılarak işlenebilir, saklanabilir ve kolayca tespite ilerlenebilir.Ekstrakte edilen DNA daha sonra tek kapta reaksiyon ve çıktı ölçüm sonuçları için doğrudan Me-qPCR platformuna uygulanabilir.Belirli kanser türlerine uygun hale getirilen ve doğrulanan teşhis modellerini kullanan basit sonuç analizinden sonra, UCOM tespit sonuçlarının nihai tespiti yarı niceliksel bir değer olarak yorumlanır ve sunulur.Me-qPCR platformu, EZ DNA Metilasyon-Gold kit protokolüne göre 3 saatlik bisülfit dönüşümü tasarrufu sağlarken UCOM tespitinde geleneksel bisülfit-pirosekanslamadan daha iyi performans gösterir.Yenilikçi metilasyon tespit platformu, UCOM tespitini daha istikrarlı, daha doğru ve daha erişilebilir hale getirir30.

Şekil 3 UCOM'ların tespit süreci.Numune türleri arasında profesyonelce numune alınmış BALF, Pap fırçası ve/veya kişinin kendisi tarafından toplanan idrar bulunur.DNA ekstraksiyon işlemi, ürünü doğrudan qPCR ile tespit edilebilen otomatik bir ekstraktöre uyarlanabilir.

UCOM'ların uygulanması

Akciğer kanseri

Akciğer kanseri dünya çapında en sık teşhis edilen ve en ölümcül ikinci kanser olup, yeni vakaların %11,4'ünü ve yeni ölümlerin %18,0'ını oluşturmaktadır1.Tüm teşhislerin %85'i küçük hücreli dışı akciğer kanseri (KHDAK) ve %15'i daha yüksek düzeyde maligniteye sahip olan küçük hücreli akciğer kanseridir (KHAK).Düşük doz bilgisayarlı tomografi (LDCT) taraması, akciğer kanseri için şu anda önerilen tarama yöntemidir ve erken teşhisi iyileştirdiği ve mortaliteyi azalttığı gösterilmiştir6;ancak düşük özgüllük ve zayıf erişilebilirlik nedeniyle LDCT, CEA39 gibi diğer yaygın kanser belirteçleri gibi henüz tatmin edici bir tarama yöntemi olarak hizmet etmemiştir.LDCT tarama stratejisinin maliyeti ve gözden kaçan teşhisler ile yanlış teşhis potansiyeli, akciğer kanseri taramasının teşvik edilmesinin ilerlemesini engellemektedir40.Bir UCOM olan HIST1H4F, bronkoalveolar sıvı (BALF) örneklerinde erken teşhis biyobelirteçleri olarak muazzam bir potansiyele sahiptir27.HIST1H4F, %96,7'lik bir tespit özgüllüğü ve %87,0'lik bir duyarlılıkla (Şekil 4A) akciğer adenokarsinomunda ve akciğer skuamöz hücreli karsinomunda hipermetile edilmiştir ve evre I kanserler için olağanüstü bir performansa sahiptir27.HIST1H4F, NSCLC için %96,5 özgüllüğe ve %85,4 duyarlılığa ve SCLC27 için sırasıyla %96,5 ve %95,7'ye sahiptir.Ek olarak, pankreas ve kolorektal kanserler de dahil olmak üzere diğer sekiz kanser türünden örnekler, HIST1H4F'nin sekiz türün tamamında hipermetile olduğunu doğrulamıştır27.

Rahim ağzı kanseri

Rahim ağzı kanseri, 2020 yılında kadınlarda en sık teşhis edilen dördüncü kanser ve kanser ölümlerinin dördüncü önde gelen nedeni olup, dünya genelinde yeni vakaların %3,1'ini ve kansere bağlı ölümlerin %3,4'ünü oluşturmuştur1.Dünya Sağlık Örgütü'nün önerdiği gibi rahim ağzı kanserini 2030 yılına kadar ortadan kaldırmak için rahim ağzı kanserinin erken teşhisi bir zorunluluktur.İnvaziv serviks kanserinde erken evrede tespit edildiği takdirde 5 yıllık sağkalım oranı %92'ye ulaşmaktadır41.Amerikan Kanser Derneği (ACS) kılavuzları tarama için servikal sitoloji testlerini, birincil HPV testlerini veya kot testlerini önermektedir42.Servikal sitoloji invazivdir ve CIN2+ vakalarının yalnızca %63,5'ini tespit edebilir37.

Bunun aksine PCDHGB7, Pap smear ve vajinal sekresyonlar kullanıldığında çok daha iyi performans gösterdi ve ultra erken bir aşamada HSIL'yi LSIL'den etkili bir şekilde ayırt edebildi.PCDHGB7 tek başına rahim ağzı kanseri için %100,0 duyarlılığa ve %88,7 özgüllüğe (Şekil 4B) ve HSIL+ numuneleri için %82,1 duyarlılığa ve %88,7 özgüllüğe sahiptir30.PCDHGB7 ayrıca toplanması çok daha kolay olan rahim ağzı kanserine yönelik vajinal salgı örneklerinde %90,9 duyarlılığa ve %90,4 özgüllüğe sahiptir30.Yüksek riskli (hr)HPV testi veya Thinprep Sitoloji Testi (TCT) ile birleştirildiğinde PCDHGB7'nin duyarlılığı %95,7 ve özgüllüğü %96,2'dir; bu da hrHPV testinin (%20,3), TCT'nin (%51,2) değerini önemli ölçüde aşar. ) ve rahim ağzı kanseri için ikisinin birleşimi (%57,8)30.PCDHGB7'nin ayrıca TCGA veri tabanında 17 kanser türünde hipermetile olduğu gösterilmiştir, bu da onun UCOM ailesi30 içinde uygunluğunu gösterir.

Şekil 4 UCOM'lar büyük ölçekli klinik çalışmalarda dört kanser türünde doğrulanmıştır.A. 508 örneğin akciğer kanseri tespitinde bir UCOM olan HIST1H4F'nin performansı.B. 844 numunenin rahim ağzı kanseri tespitinde bir UCOM olan PCDHGB7'nin performansı.C. Bir UCOM olan PCDHGB7'nin 577 endometriyal Pap ve Tao fırça örneğinin endometriyal kanser tespitindeki performansı.D. Bir UCOM olan SIX6'nın 177 örneğin ürotelyal kanser tespitindeki performansı.

EC

EC, yıllık tahmini 4,2 milyon yeni vaka ve kansere bağlı ölümlerin %1'i ile dünya çapında en yaygın kadın üreme sistemi kanserlerinden biridir1.Erken aşamada başarılı bir teşhis ile EC tedavi edilebilir ve evre I kanser için 5 yıllık hayatta kalma oranı %95'tir.Anormal uterin kanama gibi semptomatik olan hastalar periyodik klinik değerlendirmeye tabi tutulur ve invaziv ve ağrılı biyopsi prosedürlerine tabi tutulur, ancak yalnızca %5 ila %10'unda sonunda EC43 gelişir.Yaygın tespit yöntemi olarak transvajinal ultrason, benign endometriyal değişiklikleri malign endometriyal değişikliklerden ayırt edememesi ve yüksek yanlış pozitif oranı nedeniyle oldukça güvenilmezdir44.

Yaygın olarak uygulanan bir EC biyobelirteci olan serum CA-125 ile PCDHGB7'nin paralel bir karşılaştırması yapıldı.Serum CA-125'in duyarlılığı %24,8'di; bu da CA-125'in %92,3'lük özgüllüğe rağmen EC için yetersiz bir belirteç olduğunu ortaya koyuyor31.Pap fırça örnekleri kullanılarak yapılan PCDHGB7 tespiti, ECatall aşamaları için %80,65 duyarlılık ve %82,81 özgüllük sağlarken Tao fırçasının duyarlılığı %61,29 ve özgüllüğü %95,3131 idi.Me-qPCR'ye dayalı PCDHGB7 teşhis modeli, Pap ve Tao fırça örnekleri kullanılarak %98,61 hassasiyet, %60,5 özgüllük ve %85,5 genel doğruluk elde etti (Şekil 4C)31.

Ürotelyal kanser

Mesane, renal pelvis ve üreter kanserlerinden oluşan ürotelyal kanser, 2020 yılında dünya çapında en sık teşhis edilen yedinci kanser olup, yeni vakaların %5,2'sine ve ölümlerin %3,9'una neden olmuştur1.%50'den fazlası mesane kanseri olan ürotelyal kanserler, 2022'de Amerika Birleşik Devletleri'nde en sık teşhis edilen dördüncü kanser olup, yeni teşhis edilen vakaların %11,6'sını oluşturmuştur3.Mesane kanserlerinin yaklaşık %75'i, mukoza veya submukoza ile sınırlı, kas invaziv olmayan mesane kanseri olarak sınıflandırılır45.Sistoskopi biyopsisi, floresan in situ hibridizasyon (FISH) ve sitoloji testleri ile uygulanan ürotelyal kanserin teşhisinde altın standarttır.FISH ve sitolojinin tanısal performansı zayıftır ve sistoskopi müdahalecidir ve altta yatan mikrolezyonların gözden kaçırılması, lezyonların yanlış yorumlanması ve potansiyel olarak kanserin yayılmasına veya nüksetmesine neden olma riski taşır46.Daha önce doğrulanan UCOM PCDHGB7'nin de ürotelyal kanserde hipermetile olduğu, 0,86 eğrisinin altında bir alanla gösterilmiş olup, potansiyel bir tanısal kapasiteye işaret etmektedir30.Daha fazla UCOM'u daha fazla doğrulamak ve daha fazla örnek tipini daha iyi barındırmak için yeni bir UCOM olan SIX6 incelendi ve Me-qPCR platformunda idrar örnekleri kullanılarak ürotelyal kanserin erken tespitinde mükemmel teşhis potansiyeli gösterdi.İdrar numuneleri kullanılarak yapılan SIX6 tespiti, %86,7'lik rekabetçi bir duyarlılık ve %90,8'lik bir özgüllük (Şekil 4D) sergilerken, invaziv değildir ve elde edilmesi kolaydır32.SIX6'nın metastaz izleme ve tedavi etkinliği değerlendirmesindeki potansiyeli şu anda araştırılmaktadır.

Gelecek ve zorluklar

UCOM'lar çoklu kanserlerin tanı potansiyeli açısından güçlü bir performansa sahiptir ancak yapılacak daha çok iş vardır.UCOM'ların listesini genişletiyoruz ve geleneksel olarak tespit edilmesi zor olanlar da dahil olmak üzere daha fazla kanser türünde UCOM'ları aktif olarak doğruluyoruz.TCGA veritabanlarından elde edilen doğrulama sonuçları, UCOM'ların daha fazla kanser türünde ve daha fazla durumda uygulanmasını daha da doğrulamıştır.Bir ön araştırmada, UCOM'ların, mevcut tarama yöntemleriyle erken aşamada teşhis edilmesi neredeyse imkansız olan kolanjiyokarsinomlar ve pankreas adenokarsinomları için güçlü tanı potansiyeline sahip olduğu gösterilmiştir32,47.Nadir kanserleri UCOM'larla tespit etme yeteneği, geliştirilmiş bir sıvı biyopsi platformu48 aracılığıyla dolaşımdaki tümör DNA'sı (ctDNA) ile kullanılabilir.Plazma DNA bazlı pan-kanser tespit panelini içeren bir çalışma %57,9'luk bir hassasiyet ortaya koymuştur49.Yüksek spesifikliğe rağmen, genel performans hala iyileştirme için yer olduğunu ortaya koyuyor.

UCOM'ların benzersiz özellikleri aynı zamanda tedavi etkinliğinin değerlendirilmesi ve nüksün izlenmesinde UCOM potansiyelinin araştırılmasını da desteklemiştir.Solid Tümörlerde Yanıt Değerlendirme Kriterleri'ne (RECIST) göre tıbbi görüntüleme, nüksün izlenmesi ve tedavi etkinliğinin değerlendirilmesi için önerilen metodolojidir; tümör belirteçleri ise değerlendirme için tek başına kullanılır50.Ancak gerçekte görüntüleme yaklaşımları sıklık ve zamanlamadan büyük ölçüde etkilenir ve bu nedenle hastaları daha yüksek riske ve maliyetlere maruz bırakır51,52.SIX6'nın meme kanseri metastazı için bir belirleyici olarak hizmet ettiği doğrulanmıştır32.Sıvı biyopsi bazlı ctDNA izleme, radyolojik tespitten aylar önce minimum düzeyde kalan hastalık üzerinde gerçek zamanlı gözetim sağlar ve ideal olarak nüksetmeye bağlı kanser ilerlemesini geciktirir ve önler53.İlk sonuçlar, UCOM'ların ameliyat ve tedaviden hemen sonra kanserli hipermetilasyon düzeyini gerçek zamanlı olarak yansıttığını göstermektedir32.UCOM'ların sergilediği yüksek hassasiyet ve çoklu müdahaleci olmayan numune türlerinde uygulanabilirlik, UCOM'ların yüksek hasta uyumluluğunu korurken hassas bir nüksetme izleme biyobelirteç olarak hizmet etmesine olanak tanır.

Aynı zamanda teste halkın erişebilmesi de ilave çaba gerektiren bir diğer önemli konudur.Daha fazla hastaya fayda sağlanması umuduyla daha fazla hastanede UCOM tespit işbirlikleri benimsenirken, Çin'in kırsal kesimlerinde pro bono tespitler ve taramalar aktif olarak gerçekleştiriliyor.UCOM'ların, özellikle az gelişmiş alanlar için uygun bir tarama aracı olarak nitelendirilebilmesi için gelişmiş erişilebilirliğe ihtiyaç vardır.

UCOM uygulamasının erken tespit sonuçları umut verici olsa da UCOM hakkında pek çok bilinmeyen mevcut.Aktif keşifle, UCOM'ların kanserlerde neden evrensel olarak mevcut olduğuna dair ek araştırmalar garanti edilmektedir.UCOM'ların altında yatan epigenetik düzenleme mekanizmaları, kanser tedavilerine yönelik yeni bir yönelimi haklı çıkarabilecek daha fazla araştırmaya değerdir.Tümör homojenliği ve heterojenlik arasındaki etkileşime dönersek, UCOM'ların neden belirli kanser türleriyle sıkı bir şekilde bağlantılı olan kanser biyobelirteçlerinin çoğunluğu için bir istisna olabileceğiyle ilgileniyoruz.UCOM tarafından tanımlanan DNA metilasyon anormalliklerinin tümör oluşumu, tümör ilerlemesi ve metastazdaki rolü, hücre kimliğinin kaybedilmesi ve yeniden kazanılması sürecinde belirlenmemiştir ve kapsamlı bir inceleme gerektirmektedir.Bir başka önemli ilgi alanı, kanser izlerinin kesin tespitine yaklaşma ve tümör dokusu kökenlerinin ters bir şekilde tanımlanması umuduyla UCOM'ların homojenlik özelliğinin dokuya özgü belirteçlerle birleştirilmesinin kapsamında yatmaktadır.UCOM'lar kanseri önlemek, kanseri tespit etmek ve potansiyel olarak kanseri savunup ortadan kaldırmak için ideal bir araç olabilir.

Hibe desteği

Bu çalışma, Çin Ulusal Temel Ar-Ge Programı (Hibe No. 2022BEG01003), Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (Hibe No. 32270645 ve 32000505), Heilongjiang İl Sağlık Komisyonu'ndan bir Hibe (Hibe No. 2020-111) tarafından desteklenmiştir. ve Heze Bilim ve Teknoloji Enstitüsü'nden bir Hibe (Hibe No. 2021KJPT07).

Çıkar çatışması beyanı

Wei Li, Shanghai Epiprobe Bioteknoloji Co., Ltd.'nin Ar-Ge Direktörüdür. Wenqiang Yu, Epiprobe'un Bilimsel Danışma Kurulunda görev yapmaktadır.W. Yu ve Epiprobe bu çalışmayla ilgili bekleyen patentleri onayladı.Diğer tüm yazarlar rakip çıkarların olmadığını beyan eder.

Yazar Katkıları

Projeyi tasarladı ve tasarladı: Chengchen Qian ve Wenqiang Yu.

Makaleyi yazdı: Chengchen Qian.

Çizimler yaptı: Chengchen Qian.

Taslağı gözden geçirdi ve düzenledi: Xiaolong Zou, Wei Li, Yinshan Li ve Wenqiang Yu.

Referanslar

1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, LaversanneM, Soerjomataram I, Jemal A, ve diğerleri.Küresel Kanser İstatistikleri 2020: GLOBOCAN tahminleri

Dünya çapında 185 ülkede 36 kanserin görülme sıklığı ve ölüm oranı.CA Kanser J Kliniği.2021;71:209-49.

2. Xia C, Dong X, Li H, Cao M, Sun D, ​​He S ve diğerleri.Çin ve Amerika Birleşik Devletleri'ndeki kanser istatistikleri, 2022: profiller, eğilimler ve belirleyiciler.Chin MedJ (İngilizce).2022;135: 584-90.

3. Siegel RL, Miller KD, WagleNS, JemalA.Kanser istatistikleri, 2023. CA Cancer J Kliniği.2023;73:17-48.

4. Crosby D, BhatiaS, Brindle KM, Coussens LM, Dive C, Emberton M, ve diğerleri.Kanserin erken tespiti.Bilim.2022;375: eaay9040.

5. Ladabaum U, Dominitz JA, KahiC, Schoen RE.Stratejiler

kolorektal kanser taraması.Gastroenteroloji.2020;158:418-32.

6. Tanoue LT, Tanner NT, Gould MK, Silvestri GA.Akciğer kanseri taraması.Am J Respir Crit Care Med.2015;191: 19-33.

7. Bouvard V, WentzensenN, Mackie A, Berkhof J, BrothertonJ, Giorgi-Rossi P, ve diğerleri.IARC'nin rahim ağzı kanseri taramasına bakış açısı.N İngilizce Med.2021;385: 1908-18.

8. Xue P, Ng MTA, QiaoY.Düşük ve orta gelirli ülkelerde rahim ağzı kanseri taraması için kolposkopinin zorlukları ve yapay zekayla çözümler.BMC Med.2020;18:169.

9. Johnson P, Zhou Q, Dao DY, Lo YMD.Hepatoselüler karsinomun tanı ve tedavisinde dolaşımdaki biyobelirteçler.Nat Rev Gastroenterol Hepatol.2022;19: 670-81.

10. Van PoppelH, Albreht T, Basu P, HogenhoutR, CollenS, Roobol M. Serum Avrupa'da ve küresel olarak prostat kanserinin PSA bazlı erken tespiti: geçmiş, bugün ve gelecek.Nat Rev Urol.2022;19:

562-72.

11. HolyoakeA, O'Sullivan P, Pollock R, Best T, Watanabe J, KajitaY,

ve ark.Mesanenin geçiş hücreli karsinomunun tespiti ve sınıflandırılması için multipleks RNA idrar testinin geliştirilmesi.Clin Kanser Arş.2008;14:742-9.

12. Feinberg AP, Vogelstein B. Hipometilasyon, bazı insan kanserlerinin genlerini normal benzerlerinden ayırır.Doğa.1983;301:89-92.

13. Ng JM, Yu J. Kolorektal kanserde potansiyel biyobelirteçler olarak tümör baskılayıcı genlerin destekleyici hipermetilasyonu.IntJ Mol Sci.2015;16: 2472-96.

14. Esteller M. Kanser epigenomisi: DNA metilomları ve histon modifikasyon haritaları.Nat Rev Genet.2007;8: 286-98.

15. Nishiyama A, Nakanishi M. Kanserin DNA metilasyon ortamında gezinmek.Trendler Genet.2021;37: 1012-27.

16. Xie W, Schultz MD, ListerR, Hou Z, Rajagopal N, Ray P, ve diğerleri.İnsan embriyonik kök hücrelerinin çok soylu farklılaşmasının epigenomik analizi.Hücre.2013;153: 1134-48.

17. Li Y, Zheng H, Wang Q, Zhou C, WeiL, Liu X, ve diğerleri.Genom çapında analizler, Polycomb'un DNA metilasyon vadilerinin hipometilasyonunu teşvik etmedeki rolünü ortaya koymaktadır.Genom Biol.2018;19:18.

18. Koch A, JoostenSC, Feng Z, de Ruijter TC, DrahtMX, MelotteV,

ve ark.Kanserde DNA metilasyonunun analizi: konum tekrar ziyaret edildi.Nat Rev Clin Oncol.2018;15:459-66.

19. KleinEA, Richards D, Cohn A, TummalaM, Lapham R, Cosgrove D, ve diğerleri.Hedeflenen metilasyona dayalı çoklu kanser erken tespit testinin bağımsız bir doğrulama seti kullanılarak klinik olarak doğrulanması.Ann Oncol.2021;32: 1167-77.

20. Hanahan D, Weinberg RA.Kanserin belirtileri.Hücre.2000;100:57-70.

21. Hanahan D. Kanserin ayırt edici özellikleri: yeni boyutlar.Kanser Keşfi.2022;12:31-46.

22. Schwartzberg L, Kim ES, Liu D, Schrag D. Hassas onkoloji: kim, nasıl, ne, ne zaman ve ne zaman değil?Am Soc Clin Oncol Eğitim Kitabı.2017: 160-9.

23. Liu H, Meng X, Wang J. Gerçek zamanlı kantitatif metilasyon

Rahim ağzı kanseri taramasında PAX1 geninin tespiti.IntJ Gynecol Kanseri.2020;30: 1488-92.

24. Imperiale TF, RansohoffDF, Itzkowitz SH, Levin TR, Lavin P, Lidgard GP, ve diğerleri.Kolorektal kanser taraması için çok hedefli DNA testi.N İngilizce Med.2014;370: 1287-97.

25. Li J, Li Y, Li W, Luo H, Xi Y, Dong S, ve diğerleri.Kılavuz konumlandırma

dizileme, hücre kimliğini ve tümör immün gözetim ağlarını değiştiren anormal DNA metilasyon modellerini tanımlar.Genetik şifre

Res.2019;29:270-80.

26. Gao Q, LinYP, Li BS, Wang GQ, Dong LQ, Shen BY, ve diğerleri.Dolaşan hücresiz DNA metilasyon dizilimi (THUNDER) yoluyla müdahalesiz çoklu kanser tespiti: geliştirme ve bağımsız doğrulama çalışmaları.Ann Oncol.2023;34:486-95.

27. Dong S, Li W, Wang L, Hu J, Song Y, Zhang B, ve diğerleri.Histonla ilişkili genler akciğer kanserinde hipermetile edilir ve hipermetile olur

HIST1H4F pan-kanser biyobelirteci olarak hizmet edebilir.Kanser Arş.2019;79: 6101-12.

28. HeijnsdijkEA, Wever EM, AuvinenA, Hugosson J, Ciatto S, Nelen V, ve diğerleri.Prostat spesifik antijen taramasının yaşam kalitesine etkileri.N İngilizce Med.2012;367: 595-605.

29. LuzakA, Schnell-Inderst P, Bühn S, Mayer-Zitarosa A, Siebert U. Kendi kendine ödemeli sağlık hizmeti olarak sunulan kanser tarama biyobelirteç testlerinin klinik etkinliği: sistematik bir inceleme.Eur J Halk Sağlığı.2016;26: 498-505.

30. Dong S, Lu Q,Xu P, Chen L, Duan X, Mao Z, ve diğerleri.

Sadece evrensel bir kanser belirteci olarak hipermetillenmiş PCDHGB7 ve bunun erken rahim ağzı kanseri taramasında uygulanması.Clin Transl Med.2021;11: e457.

31. Yuan J, Mao Z, Lu Q,Xu P, Wang C, Xu X ve diğerleri.Endometriyal fırça örneklerinde ve servikal kazımalarda endometrial kanserin erken tespiti için bir biyobelirteç olarak hipermetillenmiş PCDHGB7.Ön Mol Biosci.2022;8: 774215.

32. Dong S, Yang Z,Xu P, Zheng W, Zhang B, Fu F, ve diğerleri.Karşılıklı olarak

Kanser öncesi aşama ve metastaz ortaya çıkışı takibi için hipermetilasyon ile SIX6'da özel epigenetik modifikasyon.Sinyal İletim Hedefi Ter.2022;7: 208.

33. Huang L, Guo Z, Wang F, Fu L. KRAS mutasyonu: kanserde ilaçlanamayandan ilaçlanabilire.Sinyal İletim Hedefi Ter.2021;6: 386.

34. Belinsky SA, Nikula KJ, PalmisanoWA, MichelsR, SaccomannoG, GabrielsonE, ve diğerleri.p16'nın (INK4a) anormal metilasyonu, akciğer kanserinde erken bir olaydır ve erken tanı için potansiyel bir biyobelirteçtir.Proc Natl Acad Sci U SA.1998;95: 11891-6.

35. Robertson KD.DNA metilasyonu ve insan hastalığı.Nat Rev Genet.2005;6: 597-610.

36. WentzensenN, Walker JL, Gold MA, Smith KM, ZunaRE,

Mathews C, ve ark.Çoklu biyopsiler ve kolposkopide rahim ağzı kanseri öncüllerinin tespiti.J Clin Oncol.2015;33:83-9.

37. De Strooper LM, Meijer CJ, Berkhof J, Hesselink AT, Snijders

PJ, Steenbergen RD, ve diğerleri.FAM19A4'ün metilasyon analizi

Rahim ağzı sıyrıklarındaki gen, rahim ağzı tespitinde oldukça etkilidir

karsinomlar ve ilerlemiş CIN2/3 lezyonları.Kanser Önceki Res (Phila).2014;7: 1251-7.

38. Taylandlı AA, Solomon BJ, Sequist LV, Gainor JF, Heist RS.Akciğer kanseri.Lancet.2021;398: 535-54.

39. Grunnet M, Sorensen JB.Akciğer kanserinde tümör belirteci olarak karsinoembriyonik antijen (CEA).Akciğer kanseri.2012;76:138-43.

40. Wood DE, KazerooniEA, Baum SL, EapenGA, EttingerDS, Hou L, ve diğerleri.Akciğer Kanseri Taraması, Versiyon 3.2018, Onkolojide NCCN Klinik Uygulama Kılavuzları.J Natl Compr Canc Netw.2018;16:412-41.

41. Amerikan Kanser Derneği.Kanser gerçekleri ve rakamları.Atlanta, GA, ABD: Amerikan Kanser Derneği;2023 [1 Mart 2023'te güncellendi;alıntı: 2023 Ağustos 22].

42. FonthamETH, Wolf AMD, Church TR, EtzioniR, Flowers CR,

Herzig A, vd.Ortalama risk altındaki bireyler için rahim ağzı kanseri taraması: Amerikan Kanser Derneği'nden 2020 kılavuz güncellemesi.CA Kanser J Kliniği.2020;70:321-46.

43. Clarke MA, Long BJ, Del Mar MorilloA, Arbyn M, Bakkum-Gamez JN, Wentzensen N. Kadınlarda endometriyal kanser riskinin postmenopozal kanama ile ilişkisi: sistematik bir inceleme ve meta-analiz.JAMA Stajyer Med.2018;178: 1210-22.

44. Jacobs I, Gentry-MaharajA, Burnell M, ManchandaR, Singh N,

Sharma A ve diğerleri.Transvajinal ultrason taramasının duyarlılığı

menopoz sonrası kadınlarda endometrial kanser için: UKCTOCS kohortu içinde bir vaka kontrol çalışması.Lancet Oncol.2011;12:38-48.

45. BabjukM, Burger M, CompératEM, Gontero P, MostafidAH,

PalouJ ve ark.Avrupa Üroloji Birliği Kas İnvazif Olmayan Mesane Kanseri Kılavuzları (TaT1 ve Karsinoma In Situ) -

2019 Güncellemesi.Euro Urol.2019;76: 639-57.

46. ​​Aragon-Ching JB.Ürotelyal üst sistem ve mesane karsinomlarının tanısı, biyolojisi ve tedavisindeki zorluklar ve ilerlemeler.Urol Oncol.2017;35: 462-4.

47. Rizvi S, KhanSA, Hallemeier CL, Kelley RK, Gores GJ.

Kolanjiyokarsinom – gelişen kavramlar ve tedavi stratejileri.Nat Rev Clin Oncol.2018;15:95-111.

48. Ye Q, Ling S, Zheng S, Xu X. Hepatoselüler sıvı biyopsisi

karsinom: dolaşımdaki tümör hücreleri ve dolaşımdaki tümör DNA'sı.Mol Kanseri.2019;18:114.

49. Zhang Y, Yao Y, Xu Y, Li L, Gong Y, Zhang K, ve diğerleri.Pan-kanser

10.000'den fazla Çinli hastada dolaşan tümör DNA tespiti.Nat İletişim.2021;12:11.

50. Eisenhauer EA, Therasse P, BogaertsJ, Schwartz LH, Sargent D, Ford R, ve diğerleri.Katı tümörlerde yeni yanıt değerlendirme kriterleri: revize edilmiş RECIST kılavuzu (versiyon 1.1).Eur J Kanser.2009;45:228-47.

51. LitièreS, Collette S, de Vries EG, Seymour L, BogaertsJ.RECIST - geleceği inşa etmek için geçmişten öğrenmek.Nat Rev Clin Oncol.

2017;14: 187-92.

52. Seymour L, BogaertsJ, Perrone A, FordR, Schwartz LH, Mandrekar S, et al.iRECIST: denemelerde kullanıma yönelik yanıt kriterlerine ilişkin kılavuzlar

immünoterapötiklerin test edilmesi.Lancet Oncol.2017;18: e143-52.

53. PantelK, Alix-Panabières C. Sıvı biyopsi ve minimal rezidüel hastalık – son gelişmeler ve tedavi için çıkarımlar.Nat Rev Clin Oncol.2019;16:409-24.

Bu makaleden şu şekilde alıntı yapın: Qian C, Zou X, Li W, Li Y, Yu W. Kansere karşı ileri karakol: yalnızca evrensel kanser belirteçleri.Kanser Biol Med.2023;20: 806-815.

doi: 10.20892/j.issn.2095-3941.2023.0313